플라스미드에 제한효소 처리결과가 왜 이렇게 나오는 것일까요?

Question

안녕하세요. 이번에 plasmid에 제한 효소를 처리해서 전기 영동을 하였는데, 밴드를 확인하니 이상해서 질문 드립니다.

맨 위의 밴드 같은 경우 잘리지 않은 밴드이고 밑에 있는 밴드가 1kb~1.5kb정도에 있습니다. 성공한 실험 결과의 경우 3개의 밴드가 나와야 하는데, 2가지의 밴드만 나오게 되었습니다. (맨 위의 밴드는 pRTL2 의 밴드가 맞습니다.)

하나 왜 나오지 않는 지 알 수 있을까요?

Answer 1

안녕하세요. 김솔 과학전문가입니다.

엔자임을 뭘 썼는지 알수 없어 정확한 답변드리기 어려우나 메틸레이션된 사이트에 작동하지 않는 엔자임인지 한번 확인해보세요. 보통 NEB에 dam dcm 메틸레이션일 때 워킹안한다고 나와있습니다.그리고 또하나 잘려진 사이즈가 겹치지 않는지 확인해보세요, 이땐 분리하기위해 젤을 더 내려야합니다.