ELISA 실험의 종류에 대해 알려주세요.
항원을 정량하는 분석법인 ELISA에 대해 공부중인데요,
ELISA에 샌드위치 등등 종류가 여러가지가 있더라구요. ELISA 분석법에는 어떤 종류가 있는지 설명 부탁드립니다.
안녕하세요. 김지호 과학전문가입니다.
ELISA 분석법은 항원을 검출하는 방법에 따라 크게 세 가지 (Direct ELISA, Indirect ELISA, Sandwich ELISA)로 나눌 수 있습니다.
첫번째, “Direct ELISA”는 항원 단백질을 immunoplate에 먼저 결합시킨 후, 효소가 결합된 항체를 사용하여 항원을 직접 검출하는 방법입니다. 이 방법은 ELISA 분석법 중 가장 간단한 방법으로, 항원이 적정량 이상으로 보통 감도로 검출이 가능하고, 항원에 대해 이용 가능한 항체가 1종류이고, 항체의 특이성이 높은 경우에 적용하기 적합합니다.
두번째, “Indirect ELISA”는 immunoplate 에 항원을 결합시킨 후, 항원 특이적인 “1차 Detection 항체”를 항원에 결합시키고, 효소가 결합된 “2차 Detection 항체”로 항원에 결합된 1차 항체를 검출하는 방법입니다. 이 방법은 2차 항체를 사용하여 1차 항체를 다시 한번 선별하는 과정에 특이성이 증가하고, 1차 항체에 2차 항체가 2개 이상 결합할 경우 2차 항체에 의한 신호 증폭이 일어납니다. 일반적으로 direct ELISA에 비해 특이성과 감도가 증가합니다. 이때 biotin이 결합된 1차 항체를 사용하고, 2차 항체 대신 효소가 결합된 streptavidin을 사용해도 비슷한 효과를 얻을 수 있습니다.
세번째, “Sandwich ELISA”는 immunoplate에 항원 특이적인 “Capture 항체”를 먼저 결합시킨 후, capture 항체에 항원을 결합시킵니다. 항원에 “1차 Detection 항체”를 결합시킨 후, 효소가 결합된 “2차 Detection 항체”로 1차 detection 항체를 검출하는 방법입니다. 이 방법은 항원의 각각 다른 부위에 결합하는 항체가 최소 2종류 이상 있어야 가능합니다. Capture와 detection을 통해 동일한 항원을 2번 선별하게 되므로 항원에 대한 특이성이 세 가지 방법 중 가장 높습니다. 각각의 step을 통해 신호의 증폭이 일어나 감도도 증가합니다.
안녕하세요! 손성민 과학전문가입니다.
ELISA는 항원을 정량하는 분석법 중 하나로 여러 가지 종류가 있습니다. 가장 일반적으로 사용되는 ELISA는 샌드위치 ELISA입니다. 이 방법은 항원을 캡처하는 표면에 항체를 고정시키고 이에 바인딩된 항원을 다른 항체로 검출하는 방식으로 작동합니다. 이 외에도 경쟁 ELISA 간접 ELISA 직접 ELISA 등 다양한 종류가 있습니다.
경쟁 ELISA는 샌드위치 ELISA와 비슷하지만 캡처 항체와 검출 항체가 같은 항원에 경쟁하게 되는 방식입니다. 간접 ELISA는 캡처 항체 없이 항원에 직접 바인딩되는 항체를 검출하는 방식으로 직접 ELISA는 캡처 항체와 검출 항체가 모두 항원에 바인딩되는 방식입니다.
ELISA 실험의 종류는 주로 항원의 종류에 따라 달라집니다. 예를 들어 단백질 항원을 검출하는 경우 샌드위치 ELISA가 가장 일반적으로 사용되지만 작은 분자 항원을 검출하는 경우 경쟁 ELISA가 더 적합할 수 있습니다. 그리고 항원의 양에 따라서도 실험 방법이 달라질 수 있습니다.
저는 ELISA 분석법에 대해 더 자세히 알고 싶으시다면 언제든지 저에게 문의해주세요. 감사합니다.
도움이 되셨다면 아래 추천과 좋아요 부탁드립니다.
안녕하세요. 홍성택 과학전문가입니다.
1. Direct ELISA: 항원을 표적으로 사용하고, 표적 항원에 특이적인 안티바디와 효소를 이용하여 측정하는 방법
2. Indirect ELISA: 표적 항원에 특이적인 안티바디를 사용하고, 이에 반응하는 2차 안티바디와 효소를 이용하여 측정하는 방법
3. Sandwich ELISA: 표적 항원을 안티바디로 둘러싸서 측정하는 방법으로, 항원이 안티바디 사이에 캡처되는 형태
4. Competitive ELISA: 안티바디와 표적 항원이 경쟁하는 방식으로 측정하는 방법