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카페인 추출 실험 후 tlc를 위한 uv램프

안녕하세요, 카페인 추출 실험을 진행하고 추출된 물질이 카페인이 맞는지 확인하기 위해 tlc를 진행하였습니다. 추출한 카페인과, 순순한 카페인을 다이클로로메테인에 녹이고 전개용매로 에틸 아세테이트를 사용하였습니다. 그리고 확인을 위해 uv램프를 비추었는데, 아무것도 보이지 않았습니다. 제가 찾아본 바에 의하면 단파장을 이용해야 한다고 하였는데, 구할 수가 없어 275nm 램프, 365nm+405nm 램프를 사용하였습니다. 확인을 위해선 꼭 254nm 파장이어야만 할까요? 그 이유도 궁금합니다. 아니면 tlc판이나 전개용매에 문제가 있을까요? tlc판은 g마켓에서 c형으로 표기되어 있는 것을 사용하였습니다.

그리고 tlc를 진행하는 자세한 과정도 알고 싶습니다. 과정에서 오류를 범한것은 아닌지 확인하고 싶어서요.🤔

감사합니다!

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3개의 답변이 있어요!
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  • 박정은 전문가
    박정은 전문가
    S. K. Che∙

    카페인 추출 실험 후 TLC를 진행할 때, UV램프의 적절한 사용과 TLC 과정의 정확성이 매우 중요합니다. 질문하신 내용에 대해 하나씩 답변드리겠습니다.

    1. UV 램프와 파장

    카페인은 UV 흡수 성질이 있어 TLC에서 일반적으로 254nm의 단파장 UV 램프를 사용합니다. 이는 다음과 같은 이유 때문입니다:

    • 254nm 파장: TLC 판에 코팅된 형광 물질(F254)은 254nm의 빛을 흡수하고, 이를 통해 샘플의 위치를 형광으로 확인할 수 있습니다. 카페인은 254nm에서 흡수하고 검은 점으로 나타납니다.

    • 275nm 및 365nm+405nm 램프: 이 파장에서는 카페인의 UV 흡수 특성이 미약해 잘 보이지 않을 수 있습니다.

    2. TLC 과정에서의 오류 가능성

    TLC를 진행하는 과정에서 여러 단계에서 오류가 발생할 수 있습니다. 각 단계를 점검해 보겠습니다.

    2.1 TLC 판 준비

    • TLC 판 종류: G마켓에서 구입한 C형 TLC 판이 일반적으로 실리카 겔이 코팅된 판이라면 문제는 없을 것입니다. 다만, 유효 기간이 지나지 않았는지, 손상이 없는지 확인하세요.

    2.2 샘플 준비

    • 샘플 용액: 추출한 카페인과 순수한 카페인을 다이클로로메테인에 적절한 농도로 녹였는지 확인하세요. 너무 농도가 낮으면 스폿이 보이지 않을 수 있습니다.

    • 스폿팅: 샘플을 TLC 판에 스폿팅할 때 너무 많이 또는 너무 적게 스폿팅하지 않았는지 확인하세요. 정확한 피펫이나 모세관을 사용하여 스폿팅하는 것이 좋습니다.

    2.3 전개 용매

    • 전개 용매: 에틸 아세테이트를 사용하셨다고 하셨는데, 에틸 아세테이트만으로는 카페인의 이동이 충분하지 않을 수 있습니다. 일반적으로 카페인의 전개 용매로는 에틸 아세테이트와 메탄올, 암모니아 혼합물을 사용합니다.

      • 예시 전개 용매: 에틸 아세테이트:메탄올:암모니아(85:10:5)

    2.4 전개 과정

    • 용매 전개: TLC 판을 전개 용매에 넣을 때 초기 스폿이 용매에 잠기지 않도록 주의하세요. 용매가 올라오는 과정을 잘 관찰하여 충분히 전개된 후 꺼내서 건조시키세요.

    • 용매 전개 종료: 용매가 TLC 판의 끝에 도달하기 전에 전개를 종료하고, 연필로 용매가 도달한 위치를 표시합니다.

    3. TLC 결과 확인

    • UV 램프: 254nm 파장의 UV 램프를 사용해 보세요. 만약 이 램프를 구할 수 없다면, UV 활성 화합물의 특성을 이용해 다른 검출 방법(예: 요오드 증기 처리)을 고려해 볼 수 있습니다.

    TLC 과정 요약

    1. TLC 판 준비: 실리카 겔이 코팅된 TLC 판 사용.

    2. 샘플 준비: 다이클로로메테인에 카페인 샘플을 녹여 적절한 농도로 준비.

    3. 스폿팅: TLC 판에 정확히 스폿팅.

    4. 전개 용매 준비: 적절한 전개 용매 혼합물(에틸 아세테이트:메탄올:암모니아 85:10:5) 사용.

    5. 전개 과정: 용매가 올라오는 과정을 관찰하고, 용매가 도달한 위치 표시.

    6. 결과 확인: 254nm UV 램프를 사용하여 TLC 판 확인.

    이 과정을 통해 오류가 발생한 부분을 점검하시고, 적절한 UV 램프와 전개 용매를 사용하여 다시 실험해 보시기 바랍니다. 성공적인 실험을 기원합니다!

  • 전상훈 전문가
    전상훈 전문가
    을지대학교∙

    카페인과 같은 유기 화합물은 일반적으로 TLC에서는 274nm에서 강한 흡수 피크를 보이므로, 램프의 문제는 아닌 것 같습니다. 사용한 TLC판의 종류에 대한 정보가 부족하지만 대부분의 경우 실리카 겔을 코팅한 판을 사용할 것 같습니다. 전개용매의 조성을 조정해볼 필요가 있습니다. 에틸 아세테이트는 카페인의 분리에 적당한 전개용매일 수 있으나, 전개용매의 극성이 시료의 극성과 잘 맞지 않으면 분리가 잘 이루어지지 않을 수 있습니다. 에틸 아세테이트와 메탄올의 비율을 조절하는 시도를 해보시길 바랍니다. 그래도 안보인다면 UV램프 254nm를 사용해 보는 것을 권장합니다.

  • 정철 박사
    정철 박사
    고려대학교 화학과∙

    안녕하세요~~~

    일반적으로 UV램프는 두가지 파장이 다 있습니다

    왜냐하면 형광을 내는 파장이다르기 때문입니다

    단파장이 필요한 물질은 장파장에선 보이지 않습니다