크리스퍼 유전자 가위를 이용한 유전자 재조합에 플라스미드가 사용되나요?

Question

제한 효소를 이용한 유전자 재조합에서 플라스미드가 벡터로써 사용되는 것으로 알고 있습니다

근데 크리스퍼-카스9을 유전자 가위로 하는 유전자 재조합에서도 사용되는지 궁금합니다

만약에 인슐린 대량생산을 위해 클로닝을 한다고 하면 제한효소처럼

1플라스미드를 추출

2일부를 크리스퍼-카스9으로 자르고

3원하는 유전자를 리가아제로 붙이고

4박테리아에 넣어 복제하도록 하는지

궁금합니다 질문 내용에도 잘못된 부분이 있다면 알려주세요!

Answer 1

네, 크리스퍼-카스9을 이용한 유전자 재조합에서도 플라스미드가 사용됩니다. 인슐린 대량 생산을 위한 클로닝 과정에서는 다음과 같은 절차를 따릅니다: 먼저 플라스미드를 추출하고, 크리스퍼-카스9을 이용해 원하는 부위를 자릅니다. 그 후, 원하는 유전자를 리가아제로 연결하고, 수정된 플라스미드를 박테리아에 넣어 복제하도록 합니다. 제한 효소 대신 크리스퍼-카스9을 이용하여 더 정밀하게 유전자를 자르고 수정할 수 있습니다.

Answer 2

안녕하세요.

CRISPR-Cas9는 유전자를 정밀하게 편집할 수 있는 기술로, 특정 DNA 서열을 자르고 교체할 수 있는 도구입니다. 그러나, 인슐린 대량 생산을 위한 클로닝 과정에서는 CRISPR-Cas9보다는 제한효소와 리가아제 같은 더 전통적인 유전자 조작 도구들이 주로 사용됩니다. CRISPR-Cas9 시스템은 특정 유전자 서열을 정밀하게 자르기 위해 사용되며, 주로 유전체 편집에 사용됩니다. 이 과정에서 플라스미드는 주로 Cas9 단백질과 gRNA(guide RNA)를 전달하기 위한 벡터로 사용될 수 있습니다. 하지만, 플라스미드를 잘라내는 과정에서는 제한효소와 유사한 방식으로 사용되지 않습니다.