광학현미경으로 유산균 관찰 도움이 필요합니다. 슬라이드 글라스에 유산균을 고정하고 HOCL 뿌리고 사진찍는 방법

Question

광학현미경으로 유산균이 살아있을 때와, HOCL 뿌려서 유산균을 죽일 때를

현미경으로 비교 관찰하고, 사진을 찍어야 합니다.

어떤 유산균이 광학현미경으로 관찰하기에 좋은 (사이즈가 커야 겠지요~, 현미경 배율이 400배에서 볼 수 있었으면 좋겠습니다.) 지와, 유산균을 슬라이드에 고정하는 방법, 그리고 여기에 HOCL을 뿌려서 유산균이 죽은

장면을 어떻게 사진 찍어야 되는 지 전문가님께 부탁드립니다.

Answer 1

안녕하세요.

광학현미경으로 관찰하기에 적합한 유산균으로는 크기가 상대적으로 크고 형태적으로 두드러진 종을 선택하는 것이 바람직합니다. Lactobacillus casei는 그 길이가 평균적으로 2-4 µm에 달하며, 이는 400배의 현미경 배율에서 충분히 관찰 가능한 크기입니다. 이 유산균은 뚜렷한 막대 형태를 나타내며 이는 관찰 및 식별을 용이하게 합니다.
유산균을 슬라이드에 고정하기 위해서는 유산균을 배양한 후, 원심분리를 통해 세포를 수집하고 PBS로 세척합니다. 이후, 글라이올 알데하이드(Glutaraldehyde)와 같은 고정체를 사용하여 세포를 고정시킵니다. 이 과정은 세포의 형태를 보존하는데 필수적입니다. 고정된 유산균을 깨끗한 슬라이드 위에 부드럽게 펴 바르고, 커버슬립을 사용하여 샘플을 덮습니다. 이때, 공기 방울이 슬라이드 사이에 남지 않도록 주의를 기울입니다.
차아염소산 용액을 슬라이드 한쪽 끝에 첨가하고 모세관 작용을 통해 용액이 슬라이드 전체에 퍼지도록 합니다. 이 화학물질은 유산균의 세포벽을 신속하게 파괴하여 세포를 사멸시키는 작용을 합니다. HOCL 처리 후 유산균의 변화를 관찰하기 위해 현미경의 초점을 정밀하게 조절하고 적절한 조명 및 필터 설정을 사용하여 최적의 이미지를 획득합니다. 죽은 세포는 일반적으로 구조가 붕괴되거나 색상이 변화하는 특징을 나타내게 됩니다.

Answer 2

광학현미경으로 유산균을 관찰하기 위해서는 배율 400배에서 쉽게 볼 수 있는 크기의 유산균을 선택해야 합니다. Lactobacillus와 같은 유산균은 크기가 커서 적합합니다. 먼저 슬라이드 글라스에 유산균을 고정하려면, 유산균 배양액을 슬라이드 글라스에 한 방울 떨어뜨리고 커버 글라스를 덮은 후, 10분 정도 건조시킵니다. 그런 다음 HOCL을 뿌려 유산균이 죽는 과정을 관찰합니다. 살아있는 유산균과 죽은 유산균을 비교 관찰할 때는 각 상태를 사진으로 찍어야 하며, 현미경 카메라를 사용해 각 단계를 기록하면 됩니다.